腹水采集分成兩類:
1:活著抽取腹水
2: 處死抽取腹水
活著抽取腹水主要用到的是酒精棉球與注射器(2-5ml) 以及滅后菌的eppendorf管(因為腹水還要分離所以用這個最好,便于離心)。方法就是用酒精棉球擦拭要進針的位置(大概是在腹部中線偏右側(cè)處), 而后先讓注射器中留點空氣而后進針再將注射器慢慢往后推腹腔中有壓力慢慢腹水會往外流,進針時要輕輕下上提一下,感覺無阻礙就好。
處死抽取腹水就是用止血鉗兩把,剪刀小號2把,鑷子2把即可。 先用剪刀鑷子輕輕在小鼠腹腔外皮剪一個小口,而后用兩把止血鉗輕輕兩邊拉開,使露出腹部,而后用另一把剪刀鑷子剪開內(nèi)皮,用槍或玻璃直管即可去腹水。也建議放置eppendorf中。
胸水的采集
主要采用胸腔穿刺法收集實驗動物的胸水,也可處死實驗動物剖開胸腔采集胸水。
穿刺點定位:
于實驗動物脊側(cè)腋后線第11~12肋間隙穿刺,穿刺針緊貼肋骨上緣,否則容易損傷肋間神經(jīng)。此部位是肺最下界之外側(cè),既可避免損傷肺組織造成氣胸,又易采集在隔肋竇的胸水。此外,也可在腹側(cè)胸壁近胸骨左側(cè)緣第4~5肋間隙穿刺。
穿刺方法:
實驗動物取立位或半臥位固定,局部皮膚去毛、消毒、麻醉,穿刺針頭與注射器之間接三通連接裝置,實驗人員以左手拇指、食指繃緊局部皮膚,右手握穿刺針緊*肋骨下緣處垂直進針,穿刺肋間肌時產(chǎn)生一定阻力,當(dāng)阻力消失有落空感時,說明已刺入胸膜腔,用左手固定穿刺針,打開三通連接裝置,緩慢抽取胸水。
操作中嚴防空氣進入胸腔,始終保持胸腔負壓。穿刺應(yīng)用手控制針頭的深度,以防穿刺過深刺傷肺臟。
建議保存在-80度冰箱。
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